AVV Transdukce

1) BALENÍ AAV

Buněčná linie 293T

• Vhodná pro balení adenoasociovaného viru (AAV).
• Podporuje vysokou úroveň exprese virových proteinů ve vysokých titrech

AAV Helper-Free Packaging Plasmid Set

• Dva plazmidy (pRC-mi342 a pHelper) určené k získání vysokého titru AAV2.
• Částice AAV2 jsou generovány bez použití pomocného viru

2) PURIFIKACE A TITRACE AAV

AAVpro Extraction Solution

• Je extrakční pufr, který zvyšuje výtěžnost AAV nejméně trojnásobně
• Poskytuje jednoduchou metodu centrifugace
• Lze použít pro jakýkoli sérotyp AAV

AAVpro Concentrator

• Vhodný pro jakýkoli sérotyp AAV
• Bez nutnosti ultracentrifugace
• Zahrnuje purifikační a filtrační kroky
• Zpracuje až 150 ml vzorku

AAVpro Titration Kit

• Je titrační souprava qPCR
• Obsahuje všechny složky potřebné pro extrakci částic AAV a detekci qPCR
• Pracovní postup trvá přibližně 2,5 hodiny

Purifikační soupravy AAVpro

• Purifikační systém založený na kolonách
• Bez nutnosti ultracentrifugace
• Snížení počtu kroků zmrazování a rozmrazování
• K dispozici je řada verzí (kompatibilita s AAV2 nebo všemi sérotypy).

3) AAV VEKTOROVÉ SYSTÉMY

AAVpro Helper Free System (AAV2)

• Sada pro přípravu AAV2
• Není potřeba pomocný virus
• Obsahuje tři plazmidy kódující faktory nezbytné k vytvoření částic AAV
• Včetně extrakčních činidel

pAAV ZsGreen1 Vector

• Lze použít jako pozitivní kontrolu k systému AAVpro Helper Free System (AAV2)
• Exprese zeleného fluorescenčního proteinu ZsGreen s vysokým jasem.

AAV Tet-Inducible Expression System

• Všechny komponenty pro tetracyklinem indukovatelnou expresi v jediném vektoru.
• Transaktivátor Tet-On 3G je exprimován z promotoru lidské fosfoglycerátkinázy 1 (PGK).
• Klonovaný gen zájmu je exprimován z promotoru P_(TRE3GS).
• Bylo prokázáno, že tato konstrukce "vše v jednom" vede až k 25 000násobné indukci

AAV Cre Recombinase System

• Sada pro přípravu částic AAV2 pro dodávání genu Cre rekombinázy pod kontrolou promotoru CMV.
• Lze ji použít při transdukci cílových buněk obsahujících floxovanou sekvenci DNA pomocí částic AAV2-CRE rekombinázy
• Výsledkem je rekombinace mezi místy loxP nebo může být použita pro tvorbu transgenních myší.

AAV2-CRISPR/Cas9 System

• Virový přenos komplexu Cas9/sgRNA umožňuje editovat obtížně transfekovatelné buňky.
• Gen Cas9 je rozdělen mezi dva plazmidy s 1,6 kb homologní oblastí, které vytvářejí gen Cas9 v plné délce.
• Exprese lidské mikroRNA miR-342 z obalového plazmidu významně zvyšuje titr AAV

AAV-LacZ Particles

• Sada pro přípravu částic AAV2 pro přenos reportérového genu lacZ do savčích buněk pod kontrolou promotoru CMV.
• Lze připravit bez pomocného viru
• Gen lacZ kóduje běžně používaný reportér, enzym beta-galaktosidázu.