Cre rekombináza

Cre rekombináza je enzym s funkcí site-specific rekombinázy, který zprostředkovává rekombinaci mezi dvěma 34 párů bází loxP míst. Lze ji použít k provádění delecí, inzerce, translokací a inverzí. Takara nabízí dva účinné způsoby přenosu rekombinázy Cre - gesikuly a AAV, včetně Cre RLP.

1) GESICLES

Dodání proteinu Cre rekombinázy bez nutnosti přítomnosti nukleové kyseliny pomocí nanovesikulí. Celý proces je mnohem jednodušší než použití plazmidových nebo virových systémů. Cre rekombináza je přítomna v aktivním stavu, takže nedochází ke zpoždění transkripce a translace.

Hlavní vlastnosti:

• Pro knockin a knockout studie
• Není nutná žádná příprava ani předúprava cílových buněk.
• Pracuje i s dělícími se a nedělícími se buňkami, primárními buňkami a buněčnými liniemi.
• Žádné riziko exprese rekombinázy Cre v cílových buňkách

2) ČÁSTICE AAV

AAVpro®  Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase) je určen k přípravě virových částic AAV sérotypu 2 pro přenos rekombinázy Cre do savčích buněk. Souprava generuje vysoký titr bez potřeby pomocného viru.

Hlavní vlastnosti:

• Dodání genu Cre rekombinázy do savčích buněk, které se obtížně transfekují.
• Vhodný také pro proliferující a neproliferující buňky
• Obsahuje extrakční roztok AAV pro účinnou izolaci viru

3) Cre RLP

Cre RNA lentivirové částice (RLP) umožňují doručení aktivní Cre mRNA do savčích buněk pomocí neintegrujících se částic podobných viru (RLP). Během procesu není přítomen ani nevzniká virový genom. RLP prokázaly vysokou účinnost a zprostředkovávají přechodnou expresi v in vitro a in vivo aplikacích zahrnujících buněčné linie, primární buňky, kmenové buňky, tkáně a organismy.

Hlavní vlastnosti:

• Lze použít u imortalizovaných buněčných linií, dělících se i nedělících se primárních buněk, kmenových buněk, tkání a různých modelových organismů.
• Žádný virový genom a rizika spojená s náhodnou genomovou integrací.
• K dispozici jako biologicky aktivní mRNA Cre rekombinázy a ZsGreen1 zabalené v RLP.