Retrovirová transdukce

Retrovirální transdukce našla své využití ve výzkumu rakoviny a kmenových buněk. Umožňuje transdukci do dělících se buněk. Retroviry však také zabudovávají svou jednovláknovou RNA do dvouvláknové DNA hostitelské buňky. Společnost Takara Bio nabízí široké portfolio produktů, které pokrývají celý pracovní postup od balení až po titraci retrovirů.

1) BALENÍ RETROVIRŮ

Univerzální balicí systém Retro-X je prémiový retrovirový balicí systém. Takara nabízí systém Retro-X, Pantropic Retroviral Expression System a buněčnou řadu AmphoPack 293.

Hlavní vlastnosti:

• GP2-293 obalová buněčná linie, kterou lze velmi snadno transfekovat.
• Všechny čtyři obaly dodávané na samostatných vektorech včetně VSV-G, ekotropního, amfotropního a dualtropního.
• Viriony lze získat za méně než 48 hodin
• Tento systém produkuje nejvyšší titry

2) NÁSTROJE PRO TRANSDUKCI RETROVIRŮ

Retro-X Concentrator
Koncentrátor Retro-X má jednoduchý protokol míchání a odstřeďování bez nutnosti ultracentrifugace. Supernatanty vektorů lze koncentrovat 10-100krát v závislosti na objemu a použité obálce.

Hlavní vlastnosti:

• Není nutná ultracentrifugace
• Jednoduchý protokol míchání a odstřeďování
• 100násobná koncentrace
• 90% výtěžnost

Retro-X™ qRT-PCR Titration Kit
Retro-X qRT-PCR Titration Kit poskytuje jednoduchou a rychlou metodu měření titru retroviru a umožňuje potvrdit úspěšnost reakce balení retroviru.

Hlavní vlastnosti:

• Souprava založená na qRT-PCR
• Provádějte konzistentní experimenty, kontrolujte počet kopií, a tím i úroveň exprese.
• Pracuje se všemi retrovirálními vektory založenými na MMLV (nikoli MSCV).
• Výsledky přibližně za 4 hodiny

Retro-X Integration Site Analysis Kit
Sada Retro-X Integration Site Analysis Kit umožňuje přesně určit místo integrace rekombinantních retrovirových vektorů pomocí technologie GenomeWalker. Je kompatibilní s většinou komerčně vyráběných retrovirusových vektorů.

Zesilovače ekotropních a amfotropních receptorů
Používají se k dočasnému zvýšení proteinů virového receptoru na povrchu cílové buňky. Umožňují účinně transdukovat lidské buňky ekotropním retrovirem nebo lenvirem, které jinak mohou infikovat pouze buňky hlodavců.

3) RETROVIROVÉ VEKTORY

Konstitutivní vektory
Retrovirové vektory transdukují širokou škálu obtížně transfekovatelných buněk a kompletní systém zahrnuje obalovou buněčnou linii PT67. Společnost Takara nabízí konstitutivní retrovirové vektory řady Q a L.

Hlavní vlastnosti:

• Navrženo pro vysoké titry retrovirů a vysokou expresi.
• Kompatibilní se všemi buněčnými liniemi Takara bio retrovirových obalů

Fluorescenční retrovirové vektory

Umožňuje retrovirální transdukci pro vysoce účinné doručení genu do široké škály buněčných typů. Jasně červené a zelené fluorescenční proteiny lze použít pro reportérové studie a jsou ideální pro fúzní studie.

Tet- inducibilní expresní systémy
Umožňuje kontrolu indukce a nízkou základní expresi pro širokou škálu dělících se buněk. Promotor TRE3G je optimalizován pro velmi těsnou kontrolu transkripce a souprava je dodávána s univerzálním balicím systémem Retro-X.

Retrovirální systém MSCV
Retrovirový expresní systém MSCV (virus myších kmenových buněk) obsahuje vektory optimalizované pro zavádění a expresi cílových genů v pluripotentních buněčných liniích, včetně myších nebo lidských hematopoetických, embryonálních kmenových a embryonálních karcinomových buněk.